溶血性链球菌检测

溶血性链球菌检测

链球菌在自然界中分布较广,可通过直接接触、空气飞沫传播或通过皮肤、粘膜伤口感染,也可通过被污染的食品如奶、肉、蛋及其制品对人类进行感染。
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溶血性链球菌检测介绍

链球菌常根据其在血琼脂培养基上溶血环的大小,分为甲乙丙三型。 其中乙型溶血性链球菌具有完全的溶血性 ,菌落周围形成一个2-4mm宽、界限分明、完全透明的无色溶血环,这类细菌称为溶血性链球菌。该菌不形成芽孢,无鞭毛,易被普通的碱性染料着色,革兰氏阳性,需氧或兼性厌氧菌,营养要求较高。

溶血性链球菌检测方式

1、样品处理:取25g固体(或25mL液体)检样加入225mL灭菌生理盐水,制成混悬液。

2、吸取5mL混悬液接种至50mL葡萄糖肉浸液肉汤,或直接划线于血平板(如检样污染严重,可同时接种5mL至匹克氏肉汤),36℃培养24h,接种血平板,36℃培养24h,挑起乙型溶血圆形突起的细小菌落,在血平板上分纯,观察在液体和固体中的培养特征、溶血情况及革兰氏染色、形态,并进行链激酶试验和杆菌肽敏感试验。

3、链激酶试验:吸取草酸钾血浆0.2mL,加0.8mL灭菌生理盐水,混匀,再加入链球菌18-24h 36℃肉浸液肉汤培养物0.5mL及0.25%氯化钙0.25mL,混匀,置于36℃水浴10min,血浆混合物自行凝固,观察凝块重新完全溶解的时间,完全溶解为阳性,如24h后不溶解即为阴性。同时用肉浸液肉汤做阴性对照,用已知的链激酶阳性的菌株做阳性对照。

4、杆菌肽敏感试验:取典型菌落的菌液涂布于血平板上,用灭菌镊子夹取每片含有0.04单位的杆菌肽纸片置于上述平板上,36℃培养18-24h,如有抑菌圈出现即为阳性。用已知的阳性菌株做对照。


溶血性链球菌检测标准

GB 4789.11-2014 食品安全国家标准 食品微生物学检验 β型溶血性链球菌检验

GB/T 4789.11-2003 食品卫生微生物学检验 溶血性链球菌检验

GB/T 18203-2000 室内空气中溶血性链球菌卫生标准

SN/T 4624.5-2016 入境环保用微生物菌剂检测方法 第5部分:β型溶血性链球菌

SN/T 2754.9-2011 出口食品中致病菌环介导恒温扩增(LAMP)检测方法.第9部分:溶血性链球菌

DB15/T 2071-2021 动物垫料中β-溶血性链球菌检测

SN/T 4972-2017 国境口岸溶血性链球菌实时荧光PCR检测方法

GB/T 14926.16-2001 实验动物 乙型溶血性链球菌检测方法


溶血性链球菌检测流程


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