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2025-02-06- 来源:中科检测
抑菌圈测试主要用于测定杀菌防霉剂对细菌、霉菌、酵母菌的抑菌作用,是定性或半定量的方法。在实际操作中,需要准备培养基、试验菌株和抗菌药物等材料,并按照一定的步骤进行实验,包括制备菌悬液、接种琼脂平板、放置药片等。

抑菌圈介绍
抑菌圈是指在细菌培养基上,细菌生长受到抗生素或其他抑菌物质抑制的范围。这个范围通常呈现为一个以抑菌物质扩散源(如青霉菌落或抗生素纸片)为圆心的规则圆形区域,在这个区域内细菌无法生长。
抑菌圈的概念最早由弗莱明在发现青霉素的过程中提出。他发现,在接种了青霉的培养皿中,青霉的周围不生长细菌,这个无菌的圆形区域就被称为抑菌圈。后来,人们发现这个抑菌圈的出现与青霉分泌的青霉素有关,青霉素有杀菌的作用,能将青霉周围一定范围内的细菌全部杀死,从而形成一个没有细菌生长的抑菌圈。
抑菌圈的大小与多种因素有关,包括抗生素的浓度、细菌的敏感性以及培养基的成分等。通常,抑菌圈越大意味着抗生素的抑菌效果越强,对细菌的杀灭作用也更强。因此,抑菌圈常被用作评估抗生素或其他抑菌物质抑菌效果的一个重要指标。
抑菌圈测试需要多长时间
抑菌圈测试的时间因细菌种类和测试条件而异,通常在16-18小时至7-10天左右。
对于某些细菌,如通过氨基糖苷纸片扩散法进行检测的细菌,抑菌圈直径的测试通常需要在35℃孵育16-18小时后进行量取1。而对于霉菌的抑菌圈实验,培养时间可能需要7-10天左右。
此外,体外抗菌活性检测的服务周期在收到样品后平均2.5-9.2个工作日内完成,但这可能不包括前期的准备和后期的数据分析时间。
因此,具体的测试时间需要根据实验条件、细菌种类以及实验目的来确定。
抑菌圈测试方法流程
准备阶段:
准备无菌培养皿、无菌吸管或针筒、圆片滤纸、带玻璃珠的无菌水、带过滤漏斗的三角板、镊子、接种针(环)、熔化状态的琼脂培养基、一定浓度的药剂以及要测试的菌种。
所有用具和材料都要事先灭菌处理,操作过程也必须在无菌环境下进行。
接种阶段:
用接种环挑取各试管斜面的菌种于带玻璃珠的无菌水中,振荡数分钟使孢子分散,过滤后制成混合孢子悬液。
用无菌吸管(或针筒)向各培养皿中注入一定浓度的混合孢子悬浮液(如0.5mL)。
将熔化状态的琼脂培养基(约45℃)注入培养皿中,与菌液混合均匀,待其冷却凝固。
放置抗菌药物阶段:
将圆片滤纸在不同浓度的防霉剂(或抗生素)中浸渍片刻,然后取出置于带菌培养基平板的中央。
也可以使用含有固定浓度抗生素的纸片直接放置在平板上(如牛津杯法)。
培养阶段:
将接种好的平板放入恒温培养箱中,在适宜的温度下(如35-37°C)培养一定时间(如16-20小时或2-3天,根据微生物种类和实验要求而定)。
结果读取阶段:
培养结束后,观察滤纸片(或抗生素纸片)周围的抑菌环大小。
使用尺子测量抑菌环的直径,以确定细菌对药物的敏感性。
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